15021202164
当前位置:上海创凌生物科技有限公司 > 产品中心 > 生物技术服务 > 细胞生物学 > 细胞凋亡实验
联系人:李小姐
电 话:15021202164
手 机:15021202164
地 址:上海市杨浦区国定东路275号8号楼815
邮 编:200433
传 真:
邮 箱:2640904730@qq.com
阿仪网商铺:http://www.app17.com/c130448/
手机网站:m.shlc-bio.com
价格:电议
采购度:98 原产地:中国大陆
发布时间:2022/8/9 15:25:03
细胞凋亡是细胞的基本特征,在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面都起到十分重要的作用。
在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36 kDa的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合,可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此,将Annexin V与PI联合使用时,PI 则被排除在活细胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性(Annexin V+/PI+)。
实验方法
Step1:细胞培养
Step2:转染或药物处理
Step3:细胞收集
Step4:加凋亡试剂
Step5:上机检测
案例展示
技术总结
1、考虑到进行流式时需要用到对照组细胞设置空白组(用于调节电压)和单染组细胞(用于调节补偿),因此要求该组细胞量较其他组多
2、如发现细胞密度偏低,细胞量较少,则适当增加离心时间。收集细胞时,应该连同上清一起收集,同时胰酶消化时间不宜过长,否则容易引起假阳性
3、检测细胞经过转染等处理后可能会带有自发荧光,应注意选择凋亡试剂盒的颜色通道 如:带绿色荧光时,应选择7AAD试剂盒
4、细胞铺板应选择细胞状态良好的时候进行,且避免反复吹打
5、流式检测细胞样本:细胞样品准备时,使用不含EDTA的胰酶消化细胞,不得使用细胞刮刀进行操作,胰酶消化细胞时切忌消化过头或没有完全打开细胞间隙
送检与交付标准
更新时间:2024/1/4 13:19:56
您感兴趣的产品* | 您还没有输入您感兴趣的产品 | |
您的单位* | 您还没有输入您的单位 | |
联系人* | 您还没有输入联系人 | |
联系电话* | 您还没有输入联系电话 | |
详细地址 | ||
常用邮箱 | 您输入的邮箱格式不正确 | |
请输入您对我们的意见或建议* | 您还没有输入您对我们的意见或建议 | |
验证码* | 您还没有输入验证码 |
温馨提示
1.遵守中华人民共和国有关法律、法规,尊重网上道德,承担一切因您的行为而直接或间接引起的法律责任。
2.请您真实的反映产品的情况,不要捏造、诬蔑、造谣。如对产品有任何疑问,也可以留言咨询。
3.未经本站同意,任何人不得利用本留言簿发布个人或团体的具有广告性质的信息或类似言论。