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徕同生物-线粒体组学-线粒体组学研究思路技术服务-2025已更新

徕同生物-线粒体组学-线粒体组学研究思路技术服务-2025已更新

价格:电议

采购度:408    原产地:中国大陆

发布时间:2022/8/9 16:20:19

线粒体组学是指围绕线粒体质量控制为核心的分子生物学研究,主要聚焦于线粒体结构和功能的变化。其中,线粒体功能主要包括:线粒体膜电位、线粒体钙渗漏、线粒体ROS生成、线粒体抗氧化能力、线粒体有氧呼吸、线粒体转运、线粒体遗传、线粒体凋亡信号;线粒体结构包括:线粒体DNA稳态、线粒体有丝分裂、线粒体自噬、和线粒体异源性(同源性)融合。

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 线粒体组学是指围绕线粒体质量控制为核心的分子生物学研究,主要聚焦于线粒体结构和功能的变化。其中,线粒体功能主要包括:线粒体膜电位、线粒体钙渗漏、线粒体ROS生成、线粒体抗氧化能力、线粒体有氧呼吸、线粒体转运、线粒体遗传、线粒体凋亡信号;线粒体结构包括:线粒体DNA稳态、线粒体有丝分裂、线粒体自噬、和线粒体异源性(同源性)融合。


线粒体组学的优势和必要性:线粒体既是能量代谢中心、也是信号传递中心、更是细胞命运(凋亡或存活)的决定者,因此线粒体对于维持细胞、组织、器官的结构和功能具有重要作用。


线粒体组学的应用范围


1. 代谢、肿瘤等疾病发病和进展的机制研究

2. 线粒体(母系)遗传疾病的分子诊断和基因筛查

3. 动植物代谢适应和代谢转变研究

4. 细胞死亡和细胞存活的双轨研究途径

5. 线粒体特异性药物的毒理学和药理学研究


线粒体组学研究思路


1.确立线粒体组学是否改变(功能还是结构,选择一种指标观察)

2.聚焦线粒体组学改变的分子过程(氧化、能量、凋亡、钙信号等)

3.选用线粒体组学常用的激活和挽救试剂药物,进行线粒体组学的正反实验模拟验证


将线粒体组学的改变上升到疾病的发病或是进展的背景中


样本获取(组织、细胞或纯化线粒体)——线粒体结构或功能检测——线粒体结构或功能检测的亚分子生物过程——线粒体组学正反实验模拟——线粒体组学在疾病中的确认



线粒体组学的研究方法


1.结构研究

a)线粒体形态学观察

i.免疫荧光技术

ii.电镜(包括普通电镜和免疫电镜)


b)线粒体DNA基因组稳态筛查

i.线粒体DNA的复制和拷贝数变化,qPCR法

ii.线粒体DNA的突变检测(点突变、框移突变等)

iii.线粒体SNP突变位点筛查

iv.线粒体RNA(包括tRNA)功能和含量鉴定,qPCR和WB法


c)线粒体特异性蛋白转位、修饰

i.线粒体凋亡蛋白(细胞色素c释放)转位检测,WB和免疫荧光法

ii.线粒体内外膜蛋白磷酸化、泛素化、乙酰化、寡聚化检测,WB或免疫荧光法


2.功能研究

a)线粒体呼吸功能

i.线粒体氧化磷酸化分析,线粒体呼吸测定仪检测

ii.线粒体有氧呼吸蛋白变化,WB或ELISA法

iii.线粒体代谢底物和代谢生成物检测,ELISA法


b)线粒体ROS(氧化应激和抗氧化能力)

i.线粒体ROS生物含量检测,流式或免疫荧光法

ii.线粒体ROS介导的磷脂或蛋白氧化:液相质谱仪或WB法

iii.线粒体ROS类型检测:荧光探针、ELISA法

iv.线粒体抗氧化蛋白含量变化:WB、ELISA


c)线粒体钙稳态

i.线粒体钙瞬时变化检测:钙火花(钙波)检测

ii.线粒体基线钙变化检测:流式或免疫荧光

iii.线粒体钙峰值分析:3D钙火花测定


d)线粒体凋亡检测

i.线粒体凋亡信号启动检测:ELISA法或免疫荧光

ii.线粒体凋亡特异性过程检测:cyt-c渗漏免疫荧光和WB法

iii.线粒体凋亡蛋白谱变化:WB或qPCR法


e)线粒体膜电位检测

i.线粒体膜电位单荧光检测(功能线粒体标记检测):流式或免疫荧光

ii.线粒体膜电位双荧光检测(功能和损伤线粒体双标记检测):流式或免疫荧光

更新时间:2025/2/13 10:20:27

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