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产品简介

EZ细胞及动物组织DNA直扩PCR试剂盒

价格：电议

采购度：631 原产地：中国大陆

发布时间：2019/2/26 10:25:06

EZ细胞及动物组织DNA直扩PCR试剂盒不用提取细胞的DNA，将细胞样品经过30分钟简单处理后，直接用于PCR扩增。可用于细胞DNA的克隆、基因编辑细胞的PCR鉴定、DNA病毒基因扩增、DNA病毒诊断等。

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标签：DNA直扩PCR试剂盒 PCR试剂盒

详细信息

创凌生物为您提供EZ细胞及动物组织DNA直扩PCR试剂盒，期待您的选购！

产品资料
产品名称：EZ细胞及动物组织DNA直扩PCR试剂盒

英文名称：EZ Cell ａnd Tissue DNA Direct PCR Kit

产品规格：50T/200T

产品价格：420/1350元

试剂盒产品用途：

动物组织或细胞DNA的扩增与克隆、转基因细胞株筛选、DNA病毒基因扩增、DNA病毒普通PCR诊断、DNA病毒Real-time PCR诊断（Taqman法）等。

试剂盒组成：

DNA-EZ-1、DNA-EZ-2、DNA-EZ-3、2×TaqMix、H2O

保质期：

-20ºC保存。使用将DNA-EZ-1、DNA-EZ-3在室温或37ºC充分溶解。DNA-EZ-2和2×TaqMix需置于冰上。

使用方法：

1、细胞或组织样品中DNA的扩增

1 将DNA-EZ-1与DNA-EZ-2以5：1的比例充分混合。

2 取20 µL细胞样品（105-106 cells/mL）或研磨的组织样品，加入6 µL上述混合液，混匀。

3 置于50ºC静置10分钟后，再置于95ºC加热10分钟。

4 加入50 μL的DNA-EZ-3，混匀。

5 取2 μL上述处理液进行PCR扩增。

2、组织块中DNA的扩增

1 用H2O将DNA-EZ-1稀释5倍，每25 μL的DNA-EZ-1稀释液加入1 μL的DNA-EZ-2，混合均匀。

2 切取半颗米粒大小的组织块（< 3 mm3），并完全浸入上述混合液中。

3 50ºC加热30分钟，每隔10分钟取出混匀次。

4 95ºC加热10分钟。

5 加入50 μL的DNA-EZ-3，混匀。

6 取2 μL上述处理液进行PCR扩增。

3、Real-time PCR

取上述细胞或组织处理液，加入特异性引物和Taqman探针，可进行特异性靶标DNA的绝对定量检测。

取上述细胞或组织处理液，加入SYBR Green PCR试剂（需自备），可进行特异性靶标DNA的相对定量检测。

4、PCR加样体系

成分	25 μL体系（推荐）	50 μL体系
2×TaqMix	12.5 μL	25 μL
Forward Primer (10 μM)	1 μL	2 μL
Reverse Primer (10 μM)	1 μL	2 μL
Template DNA	2 μL	2 μL
H2O	8.5 μL	19 μL

5、PCR程序设定

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	5 min
变性	94 ℃	30 s	30-35
退火	50~72℃	30 s
延伸	72℃	1 kb/min
终延伸	72 ℃	10 min
	4℃	Hold

注意事项

（1）取样的细胞量应当适中，浓度不宜过高或过低，处理后溶液应当以透明为宜。

（2）样品处理过程中应当防止交叉污染，推荐设置阴性对照参与处理过程，以检测环境的污染。

（3）PCR的退火温度可根据引物的预测Tm值减去5ºC，或者通过梯度PCR摸索佳退火温度。

（4）上述步骤同样适用于相应的细胞或组织中DNA病毒的PCR诊断。在进行组织中DNA病毒的诊断时，为保证准确度，推荐将病料组织研磨后再进行上述处理和扩增。

（5）TaqMix中加入了染料和相应试剂，普通PCR后可直接进行电泳，无需另加Loading buffer。

（6）处理96孔板中的细胞时，可如“组织块DNA扩增”第1步中的方法，配置裂解液后，使用排枪直接加入96孔板裂解细胞，实现高通量操作。

（7）TaqMix中的染料不影响Taqman探针的效果。

（8）使用中有任何问题欢迎扫描包装袋二维码，加QQ或微信进行咨询。

更新时间：2024/1/4 13:19:47

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